液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
1、分離樣品成分:主要功能是分離樣品中的化合物或成分。柱內(nèi)填充物(也稱為固定相)的選擇和性質(zhì)決定了分離的效果。不同的柱填充物可以根據(jù)化合物的特性(如極性、分子量、結(jié)構(gòu)等)進(jìn)行選擇,以實現(xiàn)分離和純化目標(biāo)化合物的目的。
2、保持分離效果:設(shè)計和構(gòu)造有助于保持分離效果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。柱內(nèi)填充物的特性和柱的物理參數(shù)(如長度、內(nèi)徑、顆粒大小等)對分離的選擇性和效率起著重要作用。柱的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性對于長時間運(yùn)行和重復(fù)測量非常重要。
3、與檢測器連接:作為分離部分與檢測器連接,將分離的化合物引導(dǎo)到檢測器中進(jìn)行信號檢測。柱的連接方式和接口設(shè)計對于有效地將分離的組分傳遞到檢測器中起著關(guān)鍵作用。常見的接口包括傳統(tǒng)的柱接口和現(xiàn)代的融合柱接口。
4、適應(yīng)不同應(yīng)用:可以根據(jù)不同的應(yīng)用需求進(jìn)行選擇和優(yōu)化。柱的選擇取決于分析的目標(biāo)、樣品的特性和分離的要求。例如,反相柱適用于極性化合物的分離,離子交換柱適用于離子化合物的分離,手性柱適用于手性化合物的分離等。
5、耐久性和壽命:需要具備良好的耐久性和壽命,以確保長時間的穩(wěn)定分離效果。柱的材料和填充物的質(zhì)量決定了柱的壽命和使用壽命。適當(dāng)?shù)氖褂煤途S護(hù)可以延長柱的壽命,并提高分離效果的穩(wěn)定性。